Indhold
PCR er en metode, som forskere bruger til at lave millioner af kopier af et segment af DNA. Polymeraser - en type protein enzym - hjælper med at producere nye segmenter. Forskere bruger ofte Taq-polymerase i PCR.
historie
Taq-polymerasen kommer fra bakterien Thermus aquaticus, som lever i termiske farvande. Kary Mullis og Fred Faloona udviklede PCR i midten af 1980'erne ved at bruge oprindeligt Escherichia coli polymerasen, men forskere begyndte snart at bruge Taq i PCR, fordi det var mere modstandsdygtigt over for høje temperaturer.
funktion
PCR involverer trinnene med denaturering, glødning og replikation, som regel gentages 20 til 30 gange. Denaturering adskiller DNA's dobbeltstreng i isolerede tråde. I annealingstrinet binder primrene til DNA-segmenterne, der skal kopieres. Taq polymerase begynder at arbejde på replikationstrinnet: polymerasen samler fra hver enkelt DNA-streng markeret af en primer en ny dobbeltstreng.
fordele
De høje temperaturer, der kræves for at denaturere DNA, ødelagde E. coli-polymerasen, der oprindeligt blev anvendt i PCR, hvilket nødvendiggør tilsætningen af yderligere enzym til hver cyklus. Taq polymerase kan modstå disse temperaturer, så forskere kan nu automatisk udføre flere PCR-cyklusser.
overvejelser
Taq-polymerase har en relativt høj DNA-fordoblingsfejlrate. Andre polymeraser stabile ved høje temperaturer har lavere fejlfrekvenser, men Taq er stadig den mest anvendte på grund af dens pålidelighed og alsidighed.