Indhold
- Bakterielle agarplader
- Fyldning af agarplader
- Lagring af agarplader
- Omvendt agarplader under opbevaring
- Omvendt agarplader under podning og inkubation
Agarplader bruges af forskere i cellulær og molekylærbiologi til at udføre forskningseksperimenter. De er plastiske petriskåle fyldt med agar blandet med næringsstoffer, der tillader væksten af forskellige mikroorganismer, såsom E. coli-bakterier. De betragtes som et fælles forbrugsmateriale i laboratorier, fordi de bruges hurtigt og normalt internt, i store partier og derefter opbevares.
Bakterielle agarplader
Disse plaques produceres generelt af videnskabelige teknikere, der inkorporerer laboratorieklasse agar til et bakteriekulturmedium, såsom Luria-Bertani, SOC, Terrific eller methylenblåt eosin. Fremstillingen af agarkulturmediet komplementeres af andre faktorer, som kan være nødvendige for bakterierne at overleve eller et specifikt antibiotikum (fx ampicillin eller kanamycin) for at forhindre væksten af uønskede bakterier.
Fyldning af agarplader
Agarplader fremstilles ved blot at blande kombinationen af næringsstoffer og agar med en afbalanceret pH-saltopløsning og opvarme dem, indtil de smelter. Efter at den er afkølet lidt, tilsættes varmefølsomme kosttilskud. Denne blanding hældes, mens den stadig er varm (og derfor flydende) i bunden af hver petriskål; det får lov at tørre og størkne på en overflade, på hvilken bakterielle suspensioner kan placeres. Når pladerne er helt kølige, mærkes de og opbevares indtil brug. Korrekt opbevaring af agarplader er vigtigt for at sikre, at de korrekte bakterier dyrkes og ingen uønsket forurening opstår, hvilket kan forstyrre de eksperimentelle resultater.
Lagring af agarplader
Der er flere måder at lagre agarplader på, afhængigt af hvilke kosttilskud de indeholder. Hvis der er tilsluttet lystilskud, bliver pladerne opbevaret i mørke, indpakket i folie eller opbevares i en lette beholder. Pladerne opbevares altid i køleskab eller laboratoriekøleskab ved 4 grader Celsius eller 39,2 grader Fahrenheit. Kold opbevaring kan forhindre eller minimere væksten af uønskede biologiske forurenende stoffer.
Omvendt agarplader under opbevaring
Ubrugte brædder er altid omvendt eller vendt på hovedet over deres låg under opbevaring. Dette gøres for at forhindre fordampning, hvis placket opbevares i lange perioder, hvilket kan påvirke bakteriens væksteffektivitet eller tillade multiplikation af uønskede organismer som forme.
Omvendt agarplader under podning og inkubation
Når plaquesne er blevet fyldt med en fugtig suspension af bakterier, bør den få lov til at fordampe lidt før inkubation natten over. En moderat mængde fugt vil dog stadig være til stede. Hvis plakken ikke omdannes under inkubation, vil bakterierne ikke være i stand til at fastgøre sig korrekt på agaret, hvilket enten forhindrer dem i at vokse og danne kolonier på en passende måde eller tilskynde væksten af uønskede mikroorganismer. Ethvert af disse resultater vil ugyldiggøre eksperimentet. Desuden kan kondens eller fugt forårsage scoring, hvilket gør det meget svært at vælge og analysere separate kolonier. Når bakterierne danner kolonier, gemmes pladen også på hovedet for at opretholde fugtighedsniveauer.