Hvordan man laver BDA (kartoffel dextrose agar)

Indhold

• retninger
• Forberedelse af kartoffelekstrakt
• Forbereder blandingen
• sterilisation
• Hæld blandingen
• tips
• advarsel
• Hvad du har brug for

Agar dextrose kartoffel (BDA) er et godt halvfast almindeligt medium, der anvendes til at skabe svampe. Det bruges også ofte til at isolere, dyrke og vedligeholde svampearter i formationen. Klar petriskåle eller rør indeholdende BDA kan købes, eller BDA kan hurtigt laves ved anvendelse af en kommerciel forblanding. Det er dog ikke svært at lave en enkel og effektiv version med lave omkostninger.

retninger

kartoffel (Zedcor helt ejes / PhotoObjects.net / Getty Images)

Forberedelse af kartoffelekstrakt

1. Læg kartoflerne i en pande med ca. 1,2 liter vand fra vandet og lad dem simre på en komfur i en time.

2. Fjern panden fra varmen og afkøl væsken, indtil den kan håndteres komfortabelt (ca. ti minutter).

3. Hæld flydende kartoffelekstrakt gennem et filter eller gasbind og saml det i en anden beholder.

Forbereder blandingen

1. Tilsæt dextrose og agar til en kvart med kartoffelekstraktvand.

2. Test pH-værdien af ​​opløsningen med pH-testerpapir eller pH-meter.

3. Hvis pH er over 6,5, reduceres det ved at tilføje en dråbe af saltsyreopløsningen hver gang og foretage en anden test.

   
   

4. Hvis pH er mindre end 6, juster det ved at tilføje en dråbe natriumhydroxidopløsning ad gangen og lave en ny test.

sterilisation

1. Bland godt og opdel i mindre partier på 250 ml. Hæld i fire 500 ml hætteglas (hvert hætteglas skal være halvt fyldt for ikke at koge).

2. Oplad hvert hætteglas med et stykke frit foldet aluminiumsfolie, så filmen ikke falder, men gør heller ikke en fuld forsegling.

3. Sæt krukkerne i en trykkomfur.

4. Brug trykbeholderen i overensstemmelse med producentens anvisninger til sterilisering af BDA ved 121 ° C ved 15 psi i 15 minutter.

5. Sluk trykbeholderen og lad den komme tilbage til atmosfærisk tryk, fjern derefter hætteglassene og lad dem afkøle, indtil de kan håndteres.

Hæld blandingen

1. Juster petriskålene på en plan overflade.

   
   

2. Når hætteglassene er blevet afkølet til håndteringstemperaturen, men inden mediet begynder at størkne, hold hætteglasset med den ene hånd og fjern folieafdækningen med den anden hånd.

3. For hver petriskål skal du fjerne låget med den ene hånd, hurtigt fylde halvdelen med flydende BDA og udskifte låget.

4. Gentag trin 3 ovenfor, indtil alle petriskåle er fyldt.

5. Hvis der er nogen BDA tilbage, hent flasken med det originale folielåg, lad det køle af og størkne, stram aluminiumlåget og opbevar det i køleskab.

tips

• De fleste svampe vokser godt under svagt sure forhold, så den endelige pH-værdi skal være mellem 6 og 6,5, selv om den kan justeres til enhver pH, der kræves for en bestemt art.
• Lad petriskålen dække åben lige så meget, at blandingen hældes i og dækkes så hurtigt som muligt.
• Det kræver praksis at opnå hurtighed og effektivitet i spild af agar i petriskåle.
• Efter afkøling og størkning kan BDA-retter pakkes i plastik og opbevares i køleskabet i flere måneder.
• De fleste vandhaner indeholder mineraler, der er gunstige for svampevækst, men hvis det lokale vand har ekstreme mineralkoncentrationer eller en meget høj eller lav pH, skal den erstattes med destilleret vand.

advarsel

• Følg alle drifts- og sikkerhedsanvisninger for trykkomfuret, der skal bruges.
• Lad flaskehætterne løsne ved sterilisering af trykbeholderen for at undgå overtryk.
• Brug varmebestandige handsker ved håndtering af varme beholdere.
• Brug sikkerhedsbriller, når du bruger trykbeholderen, når du fjerner den sterile BDA og under hældningen.

Hvad du har brug for

• 300 g kartofler skrællet og skåret
• pan
• Køkkenrør
• PH tester eller pH meter
• 1 molar saltsyre
• 1 molært natriumhydroxid
• 4 500 ml Ehrlenmayer glasflasker (eller andre autoklaverbare smalle mundbeholdere)
• 10 g dextrose (glucose) pulver
• 20 g agar
• Aluminiumsfolie
• Trykkoger
• Sterile petriskåle