Indhold
Bovint serumalbumin (BSA) er det mest rigelige protein i kvægserum. Den anvendes i vid udstrækning i biokemiske analyser, især i immunologiske analyser, såsom enzymbundet immunosorbent (ELISA), Western Blot og immunhistokemi. BSA stabiliserer enzymer under fordøjelsen af deoxyribonukleinsyre og forhindrer ikke-specifik proteinbinding til reagensglas og membraner. Det bruges også som en standard til at bestemme mængden af proteiner i en analyse; en ukendt mængde af det analyserede protein sammenlignes med en kendt mængde af BSA. Forberedelse af en 1 procent BSA-løsning er ret simpel.
retninger
Undgå unødvendige overførsler mellem beholdere for at forhindre forurening (Comstock / Comstock / Getty Images)-
Fyld et steriliseret bægerglas med 70 ml vand og anbring en steril magnetisk omrøringsbjælke deri. Placer bægeret på omrøringspladen og tænd den med langsom hastighed.
-
Sæt 1 g pulveriseret BSA i vejen. Overfør BSA til bægeret. Om nødvendigt øges omrøringen, indtil BSA opløses. Vent, indtil det opløses helt, inden du fortsætter.
-
Overfør indholdet af bægeret til et bægerglas. Lad omrøringsstangen stå i bægeret.
-
Fyld bægeret til 100 ml med deioniseret vand.
-
Overfør indholdet af bægeret til en steril opbevaringsflaske.
tips
- Opbevar BSA-opløsningen ved 4 ° C.
- For at lave et andet volumen skal du blot dele det endelige volumen med 100 og opløse mængden af pulveriseret BSA i deioniseret vand. For eksempel at opdele 1000 ml (1 L), divider 1000 ved 100 for at få 10, og opløs derefter 10 mg BSA i 1000 ml vand.
advarsel
- Brug personlige værnemidler, når du arbejder med biologiske agenser i laboratoriet. Disse omfatter jakker, handsker og beskyttelsesbriller for at beskytte dig mod stænk.
Hvad du har brug for
- Steriliseret bæger
- Steril magnetisk omrøringsstang
- Omrøringsplade
- BSA pulver
- balance
- Pladen til vejning
- Testrør
- Deioniseret vand
- Steriliseret opbevaringsflaske