Indhold
- retninger
- Forbereder materialerne
- Placering af sporer på pladerne
- Isolering af en ren kultur
- Forberedelse af afkom
- Inokulering af substratet til svampevækst
- tips
- advarsel
- Hvad du har brug for
Svampe kan dyrkes fra sporer eller vævskultur. Spore kulturer resulterer i populationer af genetisk forskellige svampe. Det er nyttigt, når man isolerer og tester nye stammer. Procedurer for udvikling af svampe er artsspecifikke. Det antages, at producenten ved, hvordan man dyrker en svampe af interesse, især når der er opnået nok afkom.
retninger
En samling af Agaricus svampe (Billeder af Ian Grant, Jason Hollinger)-
Forbered 500 til 1000 ml MEA i henhold til producentens anvisninger.
-
Placer natriumchloridopløsningen i reagensglas og MEA i Erlenmeyer-kolberne. Fyld ikke rør og hætteglas mere end halvvejs og dæks lidt.
-
Steriliser opløsningen af natriumchlorid, MEA og Petri retter (hvis ikke steril) i en trykbeholder ved 121 grader Celsius og 1 atm i 15 til 20 minutter.
-
Fjern MEA, natriumchloridopløsningen og petriskålene fra trykbeholderen og lad dem køle af.
-
Når MEA'et er afkølet tilstrækkeligt til at blive håndteret, men før det størkner, løftes lokket af hver petriskål forsigtigt og hæld 10 til 20 ml smeltet MEA.
-
Lad MEA og natriumchloridpladerne afkøles til stuetemperatur.
Forbereder materialerne
-
Steriliser krogen i en alkohollampe. Lad ledningen varme indtil den bliver rød, og lad den køle af i 5 sekunder.
-
Dyk krogen i natriumchloridopløsningen for at samle en dråbe væske. Spred dråbet over et lille område i spores indtryk (eller anden spore kilde) for at skabe en væske / spore blanding. Gentag denne proces flere gange, steriliser krogen mellem hver.
-
Dyk krogen ind i suspensionen af natriumchlorid og sporer for at samle sporer.
-
Løft låget på agarpladen lige nok for at give adgang til krogen.
-
Spread suspensionen fra krogen på agarets overflade og tag pladen igen. Gentag så mange kort som du vil (mindst fem eller seks).
-
Luk agarpladerne med plastfolie for at undgå tørhed. Inkuber sporerne ved passende temperatur og lysforhold for arten.
-
Overhold tegnene hver få dage og kigge efter tegn på spiring. En hvid fluffy vækst (et mycelium) på overfladen af agar, indikerer tilstedeværelsen af en svamp (men må ikke være en svamp der er vokset fra sporerne).
Dyrkning af svampe fra sporer
Placering af sporer på pladerne
-
Sammenlign myceliet med offentliggjorte beskrivelser af myceliet, du forsøger at vokse.
-
Hvis myceliet ligner forventet, rense kulturen ved at skære stykker og overføre dem til friske agarplader.
-
Fortsæt med at skære stykker fra spidsen af de ekspanderende kolonier, indtil en ren koloni er fri for bakterier.
Isolering af en ren kultur
-
Skær og overfør stykker af renset mycelium til steriliserede fiberkander eller substrat af træflis. Den anvendte type substrat afhænger af svampen.
-
Inkuber hovedmycelien under betingelser, der er egnede til arten, indtil substratet er fuldstændigt koloniseret med mycelia.
-
Ryst myceliens beholdere periodisk for at fragmentere substratet og fremskynde koloniseringen.
-
Brug hovedmycelien til at inokulere andre beholdere og producere flere mycelier.
Forberedelse af afkom
-
Ryst myceliens beholdere kraftigt for at fragmentere dem.
-
Placer mycelien i poser eller substratbakker til svampevækst.
-
Bland forsigtigt mycelien på substratet, omrør eller omrør.
-
Fortsæt i henhold til offentliggjorte metoder om, hvordan man kan dyrke myceliet og starte frugtprocessen af arten der dyrkes.
Inokulering af substratet til svampevækst
tips
- Arbejd hurtigt, når du hælder agar eller overfører inokulumet for at reducere forureningen.
- Tid og kræfter kan reddes ved at købe sterile og forberedte agarplader.
- MEA er et godt generelt medium til dyrkning af svampe, men en anden type medium kan være mere passende afhængigt af arten.
advarsel
- Trykkoger kan blive varme og forårsage skade. Følg producentens vedligeholdelses- og driftsvejledning.
- Steriliserede beholdere er varme og skal håndteres med varmebestandige handsker for at forhindre forbrændinger og spild.
- Lad beholderens låg steriliseres løst, så tryket kan udligne under opvarmning og afkøling.
- Alle beholdere, der skal steriliseres, skal være fremstillet af autoklaverbart materiale.
Hvad du har brug for
- Svampesporer
- Malt ekstrakt agar (MEA)
- Petriskåle (plader)
- Underlag egnet til arter
- Alkohollampe
- Inokulationsbeslag
- Natriumchloridopløsning (0,9% W / V)
- Trykkoger
- Testrør
- Erlenmeyer kolber
- Plastfolie
- Fartøjer eller poser til fremstilling af mycelium